紫外可見分光光度計的工作原理是由光源發出連續輻射光，經單色器按波長大小色散為單色光，單色光照射到吸收池，一部分被樣品溶液吸收，未被吸收的光經檢測器的光電管將光強度變化轉變為電信號變化，并經信號顯示系統調制放大后，顯示或打印出吸光度A（或透射比T），完成測定。

 

紫外可見分光光度計主要由電光系統、光學系統、光電系統、電子系統和數據處理、輸出打印系統等幾個部分組成。

 

在使用紫外可見分光光度計時，需要注意一些使用的維護措施：

 

1、使用的吸收池必須潔凈，并注意配對使用。量瓶、移液吸管均應校正、洗凈后使用。

 

2、取吸收池時，手指應拿毛玻璃面的兩側，裝盛樣品以池體的4/5為度，使用揮發性溶液時應加蓋，透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈，檢視應無溶劑殘留。吸收池放入樣品室時應注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈，晾干防塵保存。

 

3、供試品溶液濃度除各該品種已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之間為宜。

 

4、測定時除另有規定外，應以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照，采用1cm石英吸收池，在規定的吸收峰±2nm以內，測幾個點的吸收度或由儀器在規定的波長附近自動掃描測定，以核對供試品的吸收峰位置是否正確，并以吸收度zui大的波長作為測定波長，除另有規定外吸收度zui大波長應在該品種項下規定的測定波長±2nm以內。

 

5、選用儀器的狹縫寬度應小于供試品吸收帶的半寬度，否則測得的吸收度值會偏低，狹縫寬度的選擇應以減少狹縫寬度時供試品的吸收度不再增加為準，對于大部分被測品種，可以使用2nm縫寬。